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Il disturbo da stress post-traumatico (PTSD) è caratterizzato da una compromissione della capacità di neutralizzare le risposte di paura ai segnali associati al trauma.Studi sull'uomo e sugli animali indicano differenze nel coinvolgimento di alcune aree della corteccia frontale come mediatori chiave che determinano il successo della soppressione della paura, ma l'interazione dei circuiti neurali che determinano il coinvolgimento differenziale di queste aree non è chiara.Per comprendere meglio come le differenze individuali nel richiamo dell'estinzione si riflettono nelle differenze nell'attività del circuito neuronale, abbiamo etichettato le proiezioni dalla corteccia sublimbica del ratto (IL) con traccianti retrogradi e abbiamo confrontato le proiezioni neuronali all'interno e all'esterno dei neuroni di proiezione IL.Abbiamo analizzato questi dati, raggruppandoli in base al grado di conservazione della memoria sbiadita nei ratti.Abbiamo scoperto che nelle cellule che proiettano IL, i neuroni nel paratalamo posteriore hanno mostrato una maggiore attività nei ratti, che hanno mostrato un buon richiamo all'estinzione.Oltre alle cellule che proiettano IL, è stata osservata una maggiore attività di Fos in aree selezionate del claustrum di ratto e dell'ippocampo ventrale con buona risoluzione.I nostri risultati indicano che le differenze nel richiamo dell'estinzione sono associate a modelli specifici di attività neurale all'interno e all'esterno delle proiezioni IL.
Il condizionamento alla paura si verifica quando uno stimolo neutro è associato a uno stimolo avversivo incondizionato (UCS), tale che lo stimolo originariamente neutro, ora lo stimolo condizionato (CS), suscita una risposta di paura condizionata (CR) in assenza dell'UCS.L'inversione della paura condizionata è stata guidata da una diminuzione da CR a CS a causa della ripetuta presentazione di CS in assenza di UCS1.Precedenti ricerche hanno dimostrato che il disturbo da stress post-traumatico (PTSD) è associato all'incapacità di ricordare l'estinzione delle risposte di paura condizionata2.La pietra angolare della terapia cognitivo comportamentale per il trattamento del disturbo da stress post-traumatico è la terapia dell'esposizione basata sull'estinzione delle risposte di paura apprese3,4.Pertanto, gli studi sulle differenze individuali nella paura dell'estinzione dei roditori e sui meccanismi neurali sottostanti possono aiutare a chiarire le differenze nelle risposte umane al trauma e nel trattamento del disturbo da stress post-traumatico.Nonostante i progressi nell'identificazione dei meccanismi neurali che distinguono i ricordi di estinzione riusciti da quelli falliti, resta ancora molto da scoprire.
I modelli di roditori sono utili in questo lavoro perché ci sono significative differenze individuali nel ricordo dell'estinzione dei roditori7,8,9,10.Il lavoro precedente che studiava i meccanismi neurali dell'estinzione della paura a livello di popolazione ha dimostrato che l'attivazione della corteccia infralibica (IL) è necessaria per il richiamo dell'estinzione (rif. 11, 12, 13, ma vedi 14), e alcuni studi hanno trovato una diminuzione in l'attività dei roditori in IL che mostra scarsa memoria sull'estinzione rispetto ai roditori, che sono molto temuti.Tuttavia, i meccanismi con cui gli IL sono coinvolti in modo differenziato nel facilitare l'eliminazione della paura nei roditori rispetto a quelli che mostrano un'estinzione più debole non sono chiari.
Una possibilità è che le differenze nella memoria di estinzione della paura tra gli individui siano il risultato dell'attivazione differenziale di specifici IL afferenti.Studi anatomici18 hanno dimostrato che varie aree corticali e subcorticali del cervello inviano proiezioni dense all'IL, che a sua volta invia proiezioni efferenti a molte aree del cervello.Studi a livello di popolazione hanno dimostrato che le proiezioni IL all'amigdala sono importanti per acquisire l'estinzione della paura20,21,22 e anche l'input IL dall'amigdala basolaterale (BLA) è associato all'apprendimento dell'estinzione.C'è meno ricerca sul coinvolgimento dei circuiti incentrati sull'IL nel richiamo dell'estinzione, sebbene lavori recenti suggeriscano che sia l'ippocampo ventrale che quello dorsale siano coinvolti nella previsione dell'IL.Le proiezioni efferenti dell'IL al nucleo ricombinante del talamo, a quanto pare, partecipano anche alla memoria dell'estinzione della paura.
Questi studi precedenti stanno iniziando a dipingere un quadro dell'interazione dei circuiti neurali coinvolti nel richiamo dell'estinzione, ma ci sono pochissimi dati sul fatto che l'attività nei circuiti neurali centrati sull'IL influenzi le differenze individuali nel richiamo dell'estinzione.Qui, abbiamo cercato di determinare se le differenze nella memoria di estinzione della paura tra gli individui sono associate a cambiamenti nell'attivazione dell'input IL in specifiche regioni del cervello.In particolare, abbiamo valutato l'attivazione delle cellule afferenti IL nel nucleo paraventricolare del talamo (PVT), clavicola (CLA), BLA e ippocampo ventrale (vHPC).Queste regioni cerebrali sono state scelte sia perché inviano proiezioni dense all'IL sia perché c'è motivo di sospettare che possano essere coinvolte nell'espressione dell'estinzione della paura 18 .Ad esempio, uno studio recente ha dimostrato che la PVT, una regione nota per essere coinvolta nell'acquisizione e nella riproduzione della paura, è necessaria per la riproduzione dell'estinzione.Inoltre, studi precedenti hanno mostrato un aumento dell'amigdala basale e dell'attività vHPC nei ratti che esprimono memoria di estinzione.Infine, l'analisi del claustrum è più esplorativa dato che nessuno dei lavori precedenti ha valutato il suo ruolo nell'estinzione.Tuttavia, lavori recenti suggeriscono che abbia un ruolo nel condizionamento contestuale della paura29.
I traccianti retrogradi virali coniugati con GFP sono stati iniettati nell'IL dei ratti prima dei test comportamentali e l'attività di Fos negli afferenti IL è stata misurata durante la ripetizione dell'estinzione, il richiamo della paura e nei ratti non sottoposti a test comportamentali.I nostri risultati indicano che le proiezioni dal talamo paraventricolare posteriore all'IL mostrano una maggiore attività nei ratti che ricordano con successo l'estinzione.Oltre alle previsioni IL, l'attività neurale in alcune aree della clavicola e dell'ippocampo ventrale è aumentata nei ratti che sono regrediti bene.I nostri risultati mostrano che i modelli di attività neurale intrinseca ed estrinseca proiettati su IL sono associati a differenze individuali nella memoria di estinzione della paura.
Cinquantaquattro ratti Sprague-Dawley maschi adulti (300-325 g all'arrivo) ottenuti dai Charles River Laboratories (Raleigh, NC) sono stati usati come soggetti.I ratti sono stati alloggiati in coppia, con libero accesso a cibo e acqua, su un ciclo luce/buio di 12 ore (luci accese alle 7 del mattino).Per questi esperimenti sono stati utilizzati due gruppi di ratti (n = 28 en = 26).Dopo l'esclusione di morte, errore chirurgico, mancanza di espressione di GFP nel sito bersaglio, scarsa qualità dei tessuti e problemi comportamentali (spiegati in Metodi), il gruppo di richiamo dell'estinzione comprendeva 21 ratti e il gruppo di richiamo della paura comprendeva 7 ratti, gabbie domestiche.il gruppo era composto da 7 ratti (35 ratti sono stati inclusi nell'analisi finale).Tutte le procedure sono state approvate dal comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali della Stony Brook University ed erano conformi alle linee guida ARRIVE (https://arriveguidelines.org) e alle linee guida NIH per la cura e l'uso degli animali da laboratorio.
I ratti sono stati trattati due giorni prima dell'intervento chirurgico.I ratti sono stati anestetizzati con ketamina (87 mg/kg) e xilazina (10 mg/kg), collocati in un apparato stereotassico (Stoelting, Woodale, IL) e hanno ricevuto iniezioni unilaterali di AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) in IL.(bilanciare le iniezioni sinistra e destra).Per l'iniezione, è stata abbassata in posizione una cannula calibro 22 (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Inserire una cannula interna da 28 G (collegata a una pompa per infusione tramite tubo PE 20) nella cannula guida per erogare 0,6 ml di virus a una velocità di 0,15 ml al minuto e lasciare in posizione per 5 minuti dopo che l'infusione è intatta..Dopo la sutura, ai ratti è stato iniettato meloxicam (1 mg/kg) e non appena sono stati in grado di muoversi sono stati riportati nelle loro gabbie.I ratti sono stati tenuti nelle loro gabbie per circa 7 settimane per consentire il recupero del virus e il trasporto retrogrado.Tre ratti sono morti sotto anestesia, con il risultato che 51 ratti (94%) si sono ripresi con successo dall'intervento chirurgico.
Tutte le procedure sono state eseguite in camere di condizionamento di 32 cm × 25 cm × 21 cm (Clever Systems Inc., Reston, VA) alloggiate in scatole di isolamento fonoassorbente di 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm (Clever Sys. . Inc.).).Durante le sessioni di apprendimento sull'estinzione e di richiamo dell'estinzione, il contesto è stato modificato per essere diverso dal contesto condizionale originale.La condizione A (generazione della paura) includeva lampadine domestiche a incandescenza da 28 volt (Chicago Micro Lighting, Regno Unito), mentre la condizione B (addestramento all'estinzione, test di richiamo dell'estinzione e test di richiamo della paura) includeva lampade a LED a infrarossi (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) ., Cina;U48R).Inoltre, mentre Context A ha un pavimento dogato antivibrante con pareti in acciaio inox e plexiglass, Context B contiene inserti in metallo verniciato posti a pavimento e pareti.Anche la forma Context B è stata modificata inserendo un inserto metallico curvo di 33,5 cm x 21,3 cm in una camera di condizionamento standard.Inoltre, nel contesto A le camere sono state pulite con acido acetico al 5%, mentre nel contesto B le camere sono state pulite con idrossido di ammonio al 5%.Infine, nel contesto B, i ratti sono stati portati nella stanza del test in secchi invece di essere fatti rotolare in gabbie su carrelli.Le sessioni comportamentali sono state registrate con la videocamera superiore e il segnale video di ciascuna videocamera è stato immesso nel software (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) che ha valutato il comportamento dello sbiadimento in base alle modifiche dei pixel.I parametri sono stati scelti in modo che il comportamento dell'attenuazione stimato dal computer corrisponda strettamente al comportamento di osservatori addestrati stimato manualmente.Un valore che indica la percentuale del tempo di blocco accumulato in un intervallo di 30 secondi.
Tutti i programmi comportamentali vengono eseguiti durante la parte luminosa del ciclo luce/buio.I ratti sono stati trattati 5 giorni prima dell'inizio delle procedure comportamentali e trasportati nella stanza comportamentale per gli ultimi tre giorni di trattamento.Il primo giorno di test comportamentali, un gruppo di ratti di richiamo dell'estinzione è stato posto in un riflesso condizionato dalla paura, quindi collocato nel contesto A, dato un periodo di acclimatazione non stimolato di 6 minuti, e quindi dato entrambe le combinazioni di 4 kHz, 76 dB, 30 s .tono e terminazione generale, 1,0 mA, kick 1 s (2 min ITI).Per tutti gli addestramenti comportamentali, i ratti sono stati riportati nelle gabbie 2 minuti dopo l'ultima presentazione dello stimolo.Il giorno seguente, i ratti del gruppo di richiamo dell'estinzione sono stati collocati nella stanza contestuale B ed hanno eseguito 20 presentazioni sonore (2 min ITI) come addestramento all'estinzione dopo un periodo di assuefazione di 6 min.Il giorno successivo, i ratti del gruppo di riproduzione in estinzione sono stati esposti a 4 toni nel contesto B dopo un periodo di acclimatazione di 6 minuti come test di estinzione.I ratti nel gruppo della memoria di estinzione sono stati perfusi 60 minuti dopo la sessione comportamentale.Un gruppo di ratti di controllo che evocavano ricordi di paura è stato sottoposto alla stessa procedura il primo giorno della risposta condizionata dalla paura nel contesto A. Quarantotto ore dopo, i ratti sono stati collocati nella stanza del contesto B e sottoposti a 4 presentazioni audio (2- minuto ITI) come test di richiamo.paura dopo un periodo di acclimatamento di 6 minuti.I ratti sono stati perfusi 60 minuti dopo la sessione comportamentale.Un gruppo di ratti domestici di controllo è rimasto nelle loro gabbie domestiche per tutto l'esperimento ed è stato perfuso lo stesso giorno dei ratti sperimentali.Ciascuno dei due gruppi di ratti è stato diviso in due serie e il numero di animali in ciascun gruppo è stato bilanciato tra le serie.Un ratto nel gruppo dei ricordi di paura è stato escluso dall'analisi perché non mostrava segni di condizionamento alla paura (congelamento per meno del 15% delle volte durante il test dei ricordi di paura).Vedere la Figura 2A per un diagramma della sequenza temporale comportamentale.
Ai ratti è stata somministrata una dose eccessiva di soluzione Fatal Plus (100 mg/kg), quindi perfusa con PBS ghiacciato al 10% seguito da formalina tamponata al 10%.Il cervello è stato prelevato e conservato in una soluzione di saccarosio al 30% in formalina a 4°C per circa 1 settimana.Quindi il cervello è stato congelato e tagliato in un criostato spesso 40 µm.Le sezioni sono state conservate sequenzialmente in PBS al 10% a 4°C.Quindi, l'immunofluorescenza è stata eseguita su sezioni fluttuanti contenenti la regione cerebrale di interesse.Le sezioni sono state lavate 3 volte in PBS al 10% per 5 minuti ciascuna.Le sezioni sono state quindi incubate in una soluzione bloccante al 5% di normale siero di capra per 2 ore a temperatura ambiente, e quindi lavate altre tre volte per 5 minuti ciascuna in PBS al 10%.Le sezioni sono state quindi incubate durante la notte a 4°C in anticorpi primari (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) diluiti in 1% BSA in 10% PBS.Il giorno successivo, le sezioni sono state lavate in PBS al 10% per 30 minuti a 4°C, quindi 3 volte per 5 minuti in PBS al 10% e incubate con un anticorpo secondario (Alexa Fluor 594 goat anti-rabbit, red conjugate, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) a temperatura ambiente per 2 ore.Dopo 3 lavaggi aggiuntivi in ​​PBS al 10% per 5 minuti, le sezioni sono state poste su vetrini e sigillate con Fluoromount-G (Invitrogen).Vedere le immagini rappresentative dell'immunocolorazione nella Figura 3G.
Un microscopio a fluorescenza che utilizza una fotocamera digitale Infinity3 (Lumenera, Ottawa, Ontario, Canada) e un motore di luce (Lumencor, Beaverton, OR) collegato a un microscopio Zeiss è stato utilizzato per acquisire immagini da ciascuna regione del cervello di interesse, comprese le sezioni contenenti IL senza immunofluorescenza.eseguita per confermare il corretto posizionamento del sito di iniezione.Le immagini utilizzate per il conteggio delle cellule sono state ottenute con un ingrandimento 20x.Per ogni sezione di tessuto, prendi un'immagine con un filtro che consente la visualizzazione di GFP e un'immagine con un filtro che consente la visualizzazione del coniugato rosso Alexa Fluor nell'anticorpo secondario e il software di imaging (Infinity Analyze, versione 3) è stato utilizzato per l'immagine sovrapposizione.Acquisisci tutte le immagini di tutte le aree del cervello utilizzando lo stesso tempo di esposizione e guadagna le impostazioni.Sei ratti sono stati esclusi dall'analisi perché la principale trasmissione del virus si è verificata al di fuori dell'IL (tasso di successo dell'88%).Altri otto ratti sono stati esclusi perché, nonostante il virus attaccasse IL, non mostravano un'espressione GFP sufficiente in tutte le regioni di interesse del cervello bersaglio.Inoltre, un ratto è stato escluso a causa della scarsa qualità del tessuto.
Regolare la luminosità e il contrasto per ridurre il rumore di fondo nell'immagine J (NIH) utilizzando la stessa procedura per ciascuna immagine.I conteggi delle cellule per le cellule etichettate retrograde totali, le cellule marcate con Fos totali e le cellule con etichetta doppia totale sono state eseguite manualmente dallo sperimentatore, che non ha identificato gli animali, utilizzando il plug-in del citometro Image J.I conteggi cellulari sono stati normalizzati a cellule/mm2.Per analizzare l'espressione di Fos nelle cellule che proiettano IL, il numero di cellule con doppia etichetta è stato normalizzato al numero totale di cellule con etichetta retrograda.Per l'analisi mBLA, mvHPC e pvHPC, i conteggi delle cellule da più immagini 20x sono stati sommati e normalizzati in cellule/mm2.Per l'analisi del resto delle regioni del cervello, un'immagine 20x o una porzione di un'immagine 20x è stata analizzata e normalizzata in cellule/mm2.L'analisi vHPC includeva CA1, CA2 e regioni vHPC sottodominanti.La figura 1 mostra le regioni cerebrali analizzate con immagini che delineano il bordo antero-posteriore del piano.
Abbreviazioni e posizione delle regioni cerebrali di interesse.Spiegazione delle abbreviazioni e delle posizioni delle regioni cerebrali fornite nel manoscritto.Mappa del cervello di pubblico dominio tratta da Swanson (2004) Brain Map: Structure of the Rat Brain, 3a edizione, con licenza Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), disponibile per il download su https://larrywswanson.com.
La percentuale del tempo di congelamento viene calcolata in media su un periodo di riproduzione del tono di 30 secondi, esclusi gli intervalli intermedi.I tassi di richiamo dell'estinzione sono stati calcolati esprimendo la percentuale del tempo di dissolvenza durante il richiamo dell'estinzione come percentuale di dissolvenza durante le prime 4 prove di addestramento all'estinzione (dissolvenza durante quattro toni di richiamo dell'estinzione/dissolvenza durante i primi quattro toni di addestramento all'estinzione*100).Punteggi bassi indicano una buona memoria di dissolvenza e punteggi alti indicano scarsa memoria di dissolvenza.I ratti sono stati ordinati in base al punteggio di richiamo di estinzione, con i ratti nel terzo superiore del punteggio di richiamo di estinzione classificati come "ratti di estinzione cattivi" e i ratti negli ultimi due terzi del punteggio di richiamo di estinzione sono stati classificati come "buoni".Topi che sbiadiscono la memoria.
I test non parametrici vengono utilizzati perché i dati spesso violano le ipotesi sulla distribuzione normale e/o sull'omogeneità delle varianze.La correlazione di rango di Spearman è stata utilizzata per determinare se esisteva un'associazione significativa tra i punteggi di richiamo dell'estinzione e i marcatori Fos e i doppi marcatori nelle regioni cerebrali di interesse in tutti i ratti sottoposti al test di richiamo dell'estinzione.Il test U di Mann-Whitney è stato utilizzato per determinare se vi fosse una differenza tra due gruppi indipendenti.Il test di Kruskal-Wallis viene utilizzato per determinare se 2 o più gruppi differiscono l'uno dall'altro e il test di confronto multiplo di Dunn viene utilizzato quando la statistica di Kruskal-Wallis è significativa.Lo sbiadimento durante l'apprendimento dell'estinzione è stato valutato utilizzando l'analisi di misure ripetute della varianza con il gruppo come fattore inter-soggetto e il test come fattore intra-soggetto. I risultati sono stati considerati significativi quando p <0,05 per tutti i test statistici. I risultati sono stati considerati significativi quando p <0,05 per tutti i test statistici. I risultati sono stati calcolati con p < 0,05 per tutti i test statistici. I risultati sono stati considerati significativi a p <0,05 per tutti i test statistici.当所有统计检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。 I risultati sono stati calcolati con p < 0,05 per tutti i test statistici. I risultati sono stati considerati significativi a p <0,05 per tutti i test statistici.
La figura 2 mostra la sequenza temporale sperimentale (Figura 2A) e la distribuzione di frequenza di tutti i ratti sottoposti a estinzione (Figura 2B). I ratti nei gruppi di estinzione buoni e poveri differivano significativamente in questi punteggi di richiamo dell'estinzione calcolati (U = 0, p <0, 001) (Fig. 2C). I ratti nei gruppi di estinzione buoni e poveri differivano significativamente in questi punteggi di richiamo dell'estinzione calcolati (U = 0, p <0, 001) (Fig. 2C). Крыы в группх с хорошим и плохим уашением значитеstituire I ratti nei gruppi di estinzione buoni e poveri differivano significativamente in questi tassi di richiamo dell'estinzione calcolati (U = 0, p <0, 001) (Figura 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差异（U = 0，p <0.001）（图2C）。 U = 0，p <0.001）（图2C， В этих рассчитанных показателях припоминания угашения крысы в ​​​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). In questi tassi di richiamo dell'estinzione calcolati, i ratti nei gruppi di estinzione buoni e poveri differivano in modo significativo (U = 0, p <0,001) (Figura 2C).Non vi era alcuna differenza significativa nel tempo di congelamento tra i gruppi con buona estinzione, scarsa estinzione e richiamo della paura durante il periodo base della sessione riflessa condizionata dalla paura (X2(2) = 2.746, p = 0.253) (Figura 2D).Inoltre, durante la presentazione del primo tono del riflesso condizionato dalla paura, non vi era alcuna differenza significativa nel tempo di congelamento tra gruppi con buona estinzione, scarsa estinzione e richiamo alla paura (X2(2) = 1.107, p = 0.575), come così come durante la paura durante i secondi toni.Durante la sessione di condizionamento, c'era una differenza significativa nel tempo di congelamento tra i gruppi con buona estinzione, scarsa estinzione e richiamo della paura (X2(2) = 2.214, p = 0.331) (Figura 2D).Non vi era inoltre alcuna differenza significativa nel tempo di dissolvenza tra gruppi di estinzione buoni e poveri durante il periodo di addestramento all'estinzione di base (U = 45,00, p = 0,799) (Figura 2D). Successivamente, si è verificato un significativo effetto principale del blocco di prova (5 toni per blocco) sul tempo trascorso a congelare durante la sessione di addestramento all'estinzione (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), indicando che si è verificato l'apprendimento dell'estinzione (Fig. 2D ). Successivamente, si è verificato un significativo effetto principale del blocco di prova (5 toni per blocco) sul tempo trascorso a congelare durante la sessione di addestramento all'estinzione (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), indicando che si è verificato l'apprendimento dell'estinzione (Fig. 2D ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 тонов на блок) на время, затрачиваемое на замирание во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( riso 2D). C'era quindi un significativo effetto principale del blocco di prova (5 toni per blocco) sul tempo impiegato per congelare durante l'addestramento all'estinzione (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), indicando che era in corso l'apprendimento dell'estinzione (Fig. .2D). ).接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， 试块 （每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 的 的 主 效应 （F （2.884，54.80） = 8.331 ， P <0,001） ， 表明 表明 发生 消退 学习 （图 图 2d 图）） 。接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， 试块 （每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 的 的 主 效应 （F （2.884，54.80） = 8.331 ， P <0,001） ， 表明 表明 发生 消退 学习 （图 图 2d 图）） 。 Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис .2D). Quindi, durante l'apprendimento dell'estinzione, i blocchi di prova (5 toni per blocco) hanno avuto un effetto principale significativo sul tempo di dissolvenza (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), indicando che era in corso l'apprendimento dell'estinzione (Fig. .2D) .Tuttavia, il gruppo di estinzione (F(1, 19) = 3.091, p = 0.095) non ha avuto effetti significativi sul tempo di dissolvenza durante il periodo di addestramento all'estinzione e non vi è stata alcuna interazione tra il blocco di prova e il gruppo di estinzione (F(4 , 19)) .76) = 1.890, p = 0.121) (Fig. 2D). Durante la sessione di test, c'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione e richiamo della paura nel tempo trascorso a congelarsi durante il periodo di riferimento (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) tale che il gruppo di richiamo della paura si bloccava in modo significativo più del buon gruppo di estinzione (Mean Rank Diff. = 10,57, p = 0,017), ma non il povero gruppo di estinzione (Mean Rank Diff. = - 3,714, p > 0,999) (Fig. 2D). Durante la sessione di test, c'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione e richiamo della paura nel tempo trascorso a congelarsi durante il periodo di riferimento (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) tale che il gruppo di richiamo della paura si bloccava in modo significativo più del buon gruppo di estinzione (Mean Rank Diff. = 10,57, p = 0,017), ma non il povero gruppo di estinzione (Mean Rank Diff. = - 3,714, p > 0,999) (Fig. 2D).Durante la sessione di test, c'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione e ricordo della paura nel tempo trascorso a congelare durante il periodo di riferimento (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), tale che il gruppo di richiamo della paura si bloccava in modo significativo .больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в группе плохого вымирания (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). maggiore che nel gruppo di estinzione buono (differenza di rango medio = 10,57, p = 0,017) ma non nel gruppo di estinzione cattivo (differenza di rango medio = -3,714, p > 0,999) (Figura 2D).在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 和 恐惧 回忆组 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异 （（x2 (2) = 8.569 ， P = 0.014） ， 因此 恐惧 回忆组 冻结 显着 显着 超过 良好 的 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 灭绝 i灭绝 灭绝 tivamente （平均秩差= 10.57，p = 0.017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3.714，p > 0.999）（图2D）。在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异 （（（x2 (2) = 8.569 ， P = 0,014） ， 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 的 组 组 组 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差= 10.57，p = 0.017），但不是差绝组（平均秩差= – 3.714，p > 0.999）（图2D）。 В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угашением, группой с плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на исходном уровне (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не группа с плохим вымиранием (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). Durante il periodo di test, c'era una differenza significativa tra il gruppo di buona estinzione, il gruppo di scarsa estinzione e il gruppo di richiamo della paura in termini di tempo di congelamento al basale (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), quindi il ricordo della paura il gruppo si blocca significativamente più frequentemente del gruppo con una buona estinzione (differenza di rango medio = 10,57, p = 0,017) ma non del gruppo con scarsa estinzione (differenza di rango medio = -3,714, p > 0,999) (Figura 2D).Anche il gruppo di buona estinzione, il gruppo di scarsa estinzione e il gruppo di richiamo della paura avevano tempi di dissolvenza significativamente diversi durante la presentazione del tono della sessione di test (X2(2) = 14,93, p = 0,001), quindi il gruppo di buona estinzione aveva significativamente meno volta.tempo di congelamento rispetto al gruppo di estinzione debole (differenza di rango medio = 9,286, p = 0,044) e al gruppo di memoria della paura (differenza di rango medio = 13,86, p = 0,001) (Fig. 2D).
Differenze individuali nel ricordo dell'estinzione.(A) Schema delle procedure chirurgiche e comportamentali.(B) Distribuzione di frequenza che mostra differenze individuali nei punteggi di memoria che svaniscono.(C) Evidenza che i gruppi progettati sulla base dei punteggi di richiamo dell'estinzione calcolati rappresentano due diversi fenotipi.(D) Percentuale media di tempo in cui i ratti si congelano per cattiva estinzione, buona estinzione e richiamo della paura in 30 secondi di cellule di una sessione di riflesso di paura condizionata, in toni 20, 30 s, collassati in 5 blocchi durante la sessione di apprendimento dell'estinzione (4 toni) .ciascuno), e in quattro toni in sessioni di ricordi di dissolvenza e ricordi di paura.Le barre di errore rappresentano la deviazione standard della media. * p < 0,05, ** p < 0,01, *** p < 0,001, **** p < 0,0001. * p < 0,05, ** p < 0,01, *** p < 0,001, **** p < 0,0001. *r < 0,05, **r < 0,01, ***r < 0,001, ****r < 0,0001. * p < 0,05, ** p < 0,01, *** p < 0,001, **** p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001。 *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001。 *r < 0,05, **r < 0,01, ***r < 0,001, ****r < 0,0001. * p < 0,05, ** p < 0,01, *** p < 0,001, **** p < 0,0001.
Un indicatore retrogrado è stato iniettato nell'IL (Fig. 3A) ed è stato determinato il numero di cellule GFP + lungo l'asse antero-posteriore della regione di interesse (Fig. 3B-F).C'era una differenza significativa nel numero di cellule GFP + tra PVT anteriore, medio e posteriore (X2 (2) = 8.200, p = 0.017), quindi mPVT ha mostrato significativamente più cellule GFP + rispetto aPVT (grado medio) Diff.= 18,37, p = 0,035) e pPVT (differenza di rango medio = 17,71, p = 0,045) (Fig. 3C).Anche se diversi animali non hanno rilevato cellule GFP + in pCLA e quindi non potevano mappare l'attività in questa regione, non c'era alcuna differenza significativa tra CLA anteriore, medio e posteriore (X2(2) = 5.596, p = 0.061).Numero di celle GFP+ (Figura 3D).Quindi, poiché alcune cellule GFP+ sono state trovate in aBLA o avHPC in diversi ratti, sono state analizzate solo la parte centrale e posteriore di queste aree.Il BLA medio e posteriore (U = 393, p = 0, 009) differiva significativamente nel numero di cellule GFP +, quindi pBLA mostrava più proiezioni IL rispetto a mBLA (Figura 3E).Allo stesso modo, c'era una differenza significativa tra vHPC medio e posteriore, quindi i pvHPC mostravano più proiezioni IL rispetto ai mvHPC (U = 403,5, p = 0,014) (Figura 3F).La figura 3G è un'immagine esemplare che mostra Fos, aavRG-GFP e celle a doppia etichetta.
Quantificare le afferenze IL nell'intera regione cerebrale di interesse.(A) Rappresentazione schematica della distribuzione di aavRG-CAG-GFP nell'intero ratto IL.(B) Immagini rappresentative di marcatori retrogradi in diverse posizioni anteroposteriori nella regione cerebrale di interesse.Quantificazione dell'etichettatura retrograda lungo l'asse anteroposteriore (C) talamo paraventricolare, (D) clavicola, (E) tonsilla basolaterale e (F) ippocampo ventrale.(G) Immagini rappresentative che mostrano etichettatura aavRG retrograda, etichettatura Fos e doppia etichettatura aavRG e Fos in aPVT.Le barre di errore rappresentano la deviazione standard della media. * p < 0,05, ** p < 0,01. * p < 0,05, ** p < 0,01. *ð < 0,05, **Ó < 0,01. * p < 0,05, ** p < 0,01. * p < 0,05, ** p < 0,01。 * p < 0,05, ** p < 0,01。 *ð < 0,05, **Ó < 0,01. * p < 0,05, ** p < 0,01.Barra della scala 100 µm.La mappa del cervello di dominio pubblico nel riquadro A è riprodotta da Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Edition, concesso in licenza con licenza Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 International (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) disponibile per il download su https://larrywswanson.com.
L'attività Fos globale e specifica per la proiezione IL è stata analizzata in aPVT, mPVT e pPVT in tutti i ratti.Non vi era alcuna differenza significativa tra buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gruppi di cellule domestiche nell'espressione di Fos in aPVT (X2 (3) = 3.888, p = 0.274) (Fig. 4A), né vi era una correlazione significativa tra Fos in aPVT tra espressione e richiamo di estinzione (rs = 0,092, p = 0,691) (Figura 4B) o tra espressione Fos in aPVT IL afferenze e richiamo di estinzione (rs = 0,143, p = 0,537) (Figura 4D).Tuttavia, nelle afferenze IL aPVT, l'espressione di Fos differiva significativamente tra buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gruppi di cellule domestiche (X2(3) = 15,05, p = 0,002), quindi il gruppo di richiamo della paura ha mostrato un'estinzione relativamente buona.regressione (differenza di rango medio = 11,54, p = 0,003), regressione scadente (differenza di rango medio = 10,57, p = 0,034) e gruppi di celle domestiche (differenza di rango medio = 12,79, p = 0,005) (Fig. 4C).Inoltre, non vi era alcuna differenza significativa tra buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gruppi di cellule domestiche per l'espressione di Fos in mPVT (X2 (3) = 2.272, p = 0.518) (Fig. 4E) e per l'espressione di Fos in mPVT..Correlazione significativa con il richiamo dell'estinzione (rs = 0,168 p = 0,468) (Figura 4F).Anche se c'era una differenza significativa tra il buono, il cattivo, il ricordo della paura e i gruppi di cellule domestiche nell'espressione di Fos nelle cellule mPVT afferenti IL (X2(3) = 9.252, p = 0.026), il confronto post hoc non ha rivelato nessuno o due.Differenze significative tra i gruppi (Figura 4G).Inoltre, non vi era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos nelle cellule mPVT IL-afferenti e il richiamo dell'estinzione (rs = 0,174, p = 0,450) (Figura 4H). Successivamente, c'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gabbia domestica nell'espressione di Fos nel pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tale che il gruppo di buona estinzione (Mean Rank Diff. = 14.96, p = 0.010), ma non l'estinzione povera (Diff. di rango medio = 12.86, p = 0.113) o il gruppo di richiamo della paura (Diff. di rango medio = 2.571, p > 0.999), mostrava più espressione di Fos rispetto al gruppo gabbia domestica (Fig. 4I). Successivamente, c'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gabbia domestica nell'espressione di Fos nel pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tale che il gruppo di buona estinzione (Mean Rank Diff. = 14.96, p = 0.010), ma non l'estinzione povera (Diff. di rango medio = 12.86, p = 0.113) o il gruppo di richiamo della paura (Diff. di rango medio = 2.571, p > 0.999), mostrava più espressione di Fos rispetto al gruppo gabbia domestica (Fig. 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) или группы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (ris. 4I). Inoltre, c'era una differenza significativa tra buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gruppi di cellule domestiche nell'espressione di Fos in pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), in modo che il gruppo di buona estinzione (diff. = 14,96, p = 0,010), ma non nel gruppo di scarsa estinzione (differenza di rango medio = 12,86, p = 0,113) o nel gruppo di memoria della paura (differenza di rango medio = 2,571, p > 0,999), ha mostrato un'espressione di Fos più pronunciata rispetto a il gruppo di cellule domestiche (Figura 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 差异 （（x2 （3） = 13,89 ， P = 0,003） 消组 （（（Difff di rango medio.= 14.96, p = 0.010)，但不是较差的消退(Differenza media rango = 12.86, p = 0.113) 或恐惧回忆组(Differenza media rango = 2.571, p > 0.999) ， ）。= 14.96, p = 0.010)，但不是较差的消退(Diff. rango medio = 12.86, p = 0.113) ）.In secondo luogo, c'erano differenze significative nell'espressione di Fos in pPVT tra il buono, il cattivo, il richiamo della paura e i gruppi di cellule domestiche (X2(3) = 13,89, p = 0,003), rendendo il gruppo di assunzione buono (differenza di rango medio = 14,96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), ma non peggiore nell'estinzione (differenza di rango medio = 12,86, p = 0,113) o nel gruppo di richiamo della paura (differenza di rango medio = 2,571, p > 0,999) rispetto al gruppo di cellule domestiche (Figura 4I)..Tuttavia, non vi era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di pPVT Fos e il richiamo dell'estinzione (rs = 0,051, p = 0,825) (Figura 4J).Infine, c'era una differenza significativa nell'espressione di Fos nelle afferenze IL pPVT tra gruppi con buona estinzione, scarsa estinzione, ricordi di paura e nelle cellule domestiche (X2(3) = 12,34 p = 0,006), quindi una buona espressione di Fos in IL- era peggiore che nei gruppi di estinzione (differenza di rango medio = 12,54, p = 0,014) e nella cella domestica (differenza di rango medio = 12,89, p = 0,049) (Fig. 4K) e significativamente correlata con afferenze IL all'interno di pPVT Tra attivazione e revoca dell'estinzione, un migliore richiamo dell'estinzione era associato a una maggiore attivazione di queste afferenze IL (rs = -0,438, p = 0,047) (Figura 4L).
L'attività di Fos è stata aumentata nelle afferenze IL del talamo paraventricolare posteriore (PVT) nei ratti, che hanno mostrato una buona regressione.(A) Non c'erano differenze significative tra i gruppi nell'espressione di Fos in aPVT.(B) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos e il richiamo dell'estinzione in aPVT.(C) Il gruppo di richiamo della paura ha mostrato una maggiore espressione di Fos negli afferenze IL rispetto a tutti gli altri gruppi.(D) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos negli afferenti IL e il richiamo dell'estinzione in aPVT.(E) Non ci sono state differenze significative tra i gruppi nell'espressione di Fos in mPVT.(F) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos e la memoria di estinzione in mPVT.(G) L'espressione di Fos nelle cellule IL afferenti in mPVT non differiva significativamente tra i gruppi.( H ) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos negli afferenti IL e il richiamo dell'estinzione in mPVT.(I) Un gruppo ben estinto, ma nessun altro gruppo, ha mostrato una maggiore attività di Fos in pPVT rispetto al gruppo della gabbia domestica.(J) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos e il richiamo dell'estinzione in pPVT.(K) Il buon gruppo di estinzione ha mostrato una maggiore espressione di Fos nelle cellule afferenti IL rispetto al gruppo di estinzione debole e al gruppo di cellule domestiche.(L) Esiste una correlazione significativa tra l'espressione di Fos nelle afferenze IL e il richiamo di estinzione, quindi un buon richiamo di estinzione è associato a una maggiore espressione di Fos nelle afferenze IL.Le barre di errore rappresentano la deviazione standard della media. * p < 0,05, ** p < 0,01. * p < 0,05, ** p < 0,01. *ð < 0,05, **Ó < 0,01. * p < 0,05, ** p < 0,01. * p < 0,05, ** p < 0,01。 * p < 0,05, ** p < 0,01。 *ð < 0,05, **Ó < 0,01. * p < 0,05, ** p < 0,01.
L'attività Fos globale e specifica per la proiezione IL in aCLA e mCLA di ratti è stata quindi analizzata in tutti i gruppi. C'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gabbia domestica nell'espressione di Fos nell'aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) tale che il gruppo di richiamo della paura (Differenza di rango medio = 14.50, p = 0.049), ma né i gruppi poveri (differenza di rango medio = 10.21, p = 0.373) né i gruppi di buona estinzione (differenza di rango medio = 4.607, p > 0.999) hanno mostrato più espressione di Fos rispetto al gruppo della gabbia domestica ( figura 5A). C'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gabbia domestica nell'espressione di Fos nell'aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) tale che il gruppo di richiamo della paura (Differenza di rango medio = 14.50, p = 0.049), ma né i gruppi poveri (differenza di rango medio = 10.21, p = 0.373) né i gruppi di buona estinzione (differenza di rango medio = 4.607, p > 0.999) hanno mostrato più espressione di Fos rispetto al gruppo della gabbia domestica ( figura 5A). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое различие = 14,50, p = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4,607, p > 0,999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис .5А). C'era una differenza significativa nell'espressione di aCLA Fos tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione, ricordo della paura e cellule domestiche (X2 (3) = 8.455, p = 0.036), in modo che il gruppo di richiamo della paura (differenza di rango medio = 14.50, p = 0,049), ma né i poveri (differenza di rango medio = 10,21, p = 0,373) né il gruppo di estinzione buono (differenza di rango medio = 4,607, p > 0,999) hanno mostrato più espressione di Fos rispetto al gruppo di cellule domestiche (Fig. .5A) . acla 中 fos 表达 的 良好 消退 、 消退差 、 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 (rango medio diff. = 14,50 ， p = 0.049） ， 但 无论是 差 （平均 秩差 = 10.21 ， P = 0.373） 还是 良好 灭绝 （平均 秩差 = 4.607 ， P> 0.999） 组 都 显示 出 出 比 家庭 笼组 更 多 的 Fos 表达 （图 5A) 。 Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (media Rank Diff. = 14.50 ， P = P = P = P = P = 14. 0.049） ， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10.21 ， p = 0.373） 良好 灭绝 （平 p均 秩差 0.7 = ， 0.999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50) , p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). C'era una differenza significativa tra buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gruppi di cellule domestiche nell'espressione aCLA Fos (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), quindi gruppo di richiamo della paura (differenza di rango medio = 14,50), p = 0,049 ), ma i gruppi con scarsa (differenza di rango medio = 10,21, p = 0,373) e buona estinzione (differenza di rango medio = 4,607, p > 0,999) hanno mostrato un'espressione di Fos più elevata rispetto al gruppo di cellule domestiche (Fig. 5A). .Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione globale di Fos in (rs = 0,036, p = 0,876) (Figura 5B) o l'espressione di Fos nelle cellule afferenti IL aCLA (rs = -0,282, p = 0,215) e il richiamo dell'estinzione (Figura 5B)..5D), inoltre, non vi era alcuna differenza significativa tra buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gruppi di cellule domestiche nell'espressione di Fos negli afferenti IL aCLA (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (Figura 5C)..). Successivamente, c'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gabbia domestica nell'espressione di Fos nell'mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) tale che il gruppo di buona estinzione (Mean Rank Diff . = 12,93, p = 0,038), ma né i gruppi di scarsa estinzione (differenza di rango medio = 5,143, p > 0,999) né i gruppi di richiamo della paura (differenza di rango medio = 14,00, p = 0,063) hanno mostrato un'espressione significativamente maggiore di Fos nel mCLA rispetto al gruppo gabbia domestica (Fig. 5E). Successivamente, c'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gabbia domestica nell'espressione di Fos nell'mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) tale che il gruppo di buona estinzione (Mean Rank Diff . = 12,93, p = 0,038), ma né i gruppi di scarsa estinzione (differenza di rango medio = 5,143, p > 0,999) né i gruppi di richiamo della paura (differenza di rango medio = 14,00, p = 0,063) hanno mostrato un'espressione significativamente maggiore di Fos nel mCLA rispetto al gruppo gabbia domestica (Fig. 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями о страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (средняя разница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos in mCLA. C'era quindi una differenza significativa tra buona estinzione, scarsa estinzione, ricordi di paura e gruppi di cellule domestiche nell'espressione di mCLA Fos (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), in modo che il gruppo di buona estinzione (grado di differenza medio = 12,93, p = 0,038), ma né i gruppi di scarsa estinzione (differenza di rango medio = 5,143, p > 0,999) né i gruppi di richiamo della paura (differenza di rango medio = 14,00, p = 0,063) hanno mostrato un'espressione di Fos significativamente maggiore in mCLA.rispetto al gruppo gabbia domestica (Figura 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 差异 （x2 （3） = 10.12 ， p = 0.018） ， 良好 （（（（（（ （（（ Differenza rango medio .= 12,93, p = 0,038) ， 但 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 = 5.143 ， P> 0.999） 和 恐惧 回忆组 （平均 = 14.00 ， P = 0.063） 均 未 未 显示 更 多 的 FOS 表达相对于家庭笼组（图5E）。 = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5.143 ， p> 0.999） 和 回忆组 （平均 = 14.00 ， P = 0.063）） 未 显示 出 多 多 的 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, группой с плохим угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хорошего угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клеткой (Рисунок 5E). Inoltre, c'era una differenza significativa nell'espressione di Fos in mCLA tra il gruppo di estinzione buono, il gruppo di estinzione povero, il gruppo di feedback della paura e il gruppo di cellule domestiche (X2(3) = 10.12, p = 0.018), quindi, il buon estinzione (differenza di rango medio = 12,93, p = 0,038), ma in mCLA né l'estinzione debole (differenza di rango medio = 5,143, p > 0,999) né il gruppo di richiamo della paura (differenza di rango medio = 14,00, p = 0,999) = 0,063) hanno mostrato risultati migliori Espressione Multi Fos rispetto al gruppo cellulare domestico (Figura 5E).Tuttavia, l'espressione globale di Fos in mCLA (rs = 0, 321, p = 0, 156) (Fig. 5F) o in cellule IL mCLA afferenti (rs = -0, 121, p = 0, 602) e richiamo di estinzione (Fig. 5 H), nessuna differenza significativa tra gruppi con buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e una cellula domestica per l'espressione di Fos nelle cellule afferenti IL mCLA (X2(3)=4.923, p=0.178) (Figura 5G).
L'attività di Fos era elevata a metà claustrum nei ratti con una buona memoria di estinzione.(A) Il gruppo di richiamo della paura, ma non gli altri gruppi, ha mostrato una maggiore attività di Fos rispetto al gruppo di cellule domestiche in aCLA.(B) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos in aCLA e il richiamo dell'estinzione.(C) L'espressione di Fos nelle cellule aCLA afferenti IL non differiva significativamente tra i gruppi.(D) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos negli afferenti IL e il richiamo dell'estinzione in aCLA.(E) Il gruppo ben estinto, ma non gli altri gruppi, ha mostrato una maggiore attività di Fos in mCLA rispetto al gruppo di cellule domestiche.(F) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos e il richiamo dell'estinzione in mCLA.(G) L'espressione di Fos nelle cellule afferenti IL mCLA non differiva significativamente tra i gruppi.( H ) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos negli afferenti IL e il richiamo dell'estinzione in mCLA.Le barre di errore rappresentano la deviazione standard della media. *p<0,05. *p<0,05. *ð < 0,05. *p<0,05. *p<0,05。 *p<0,05。 *ð < 0,05. *p<0,05.
Quindi, l'attività Fos globale e specifica per la proiezione IL in mBLA e pBLA è stata analizzata in tutti i gruppi di ratti.Non c'era alcuna differenza significativa tra buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gruppi di cellule domestiche nell'espressione di Fos in mBLA (X2(3)=0.944, p=0.815) (Figura 6A).Inoltre, non vi era alcuna differenza significativa tra i gruppi con buona regressione, scarsa regressione, richiamo della paura ed espressione di Fos delle cellule domestiche nelle cellule afferenti IL mBLA (X2(3)=0,518, p=0,915) (Figura 6C).Inoltre, non vi era alcuna correlazione significativa tra l'espressione Fos globale in mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (Figura 6B) e l'espressione Fos nelle cellule afferenti IL mBLA (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).Figura 6D) e richiamo dell'estinzione.Non vi era inoltre alcuna differenza significativa nella buona estinzione, nella scarsa estinzione, nella memoria della paura e nei gruppi di cellule domestiche nell'espressione di Fos in pBLA (X2 (3) = 4.246, p = 0.236) (Fig. 6E), e non vi era alcuna differenza significativa in pBLA Buono.estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gruppi di cellule domestiche nell'espressione Fos nelle cellule afferenti IL (X2(3)=1.954, p=0.582) (Figura 6G).Infine, espressione globale di Fos in pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (Fig. 6F) ed espressione di Fos in cellule afferenti IL pBLA (rs = 0,122, p = 0,597) e richiamo di estinzione (Fig. 6H).
Le differenze individuali nella riproduzione dell'estinzione non sono state mappate alle differenze nell'espressione di Fos nell'amigdala basolaterale.(A) Non c'erano differenze significative tra i gruppi nell'espressione di Fos in mBLA.(B) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos e il richiamo dell'estinzione in mBLA.(C) L'espressione di Fos nelle cellule afferenti IL mBLA non differiva significativamente tra i gruppi.(D) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos nelle cellule afferenti IL e il richiamo dell'estinzione in mBLA.(E) Non c'erano differenze significative tra i gruppi nell'espressione di Fos in pBLA.(F) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos e il richiamo dell'estinzione in pBLA.(G) L'espressione di Fos nelle cellule IL pBLA afferenti non differiva significativamente tra i gruppi.( H ) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos nelle cellule afferenti IL e il richiamo dell'estinzione in pBLA.Le barre di errore rappresentano la deviazione standard della media.
Infine, l'attività Fos globale e specifica per la proiezione IL è stata analizzata in mvHPC e pvHPC in tutti i ratti. C'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gabbia domestica nell'espressione di Fos nel mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) tale che la buona estinzione (Differenza di rango medio = 13,29 , p = 0,031), ma né i gruppi di scarsa estinzione (Mean Rank Diff. = 6,857, p > 0,999) né di richiamo della paura (Mean Rank Diff. = 8,000, p = 0,864) hanno mostrato più espressione di Fos rispetto al gruppo home cage (Fig. 7A). C'era una differenza significativa tra i gruppi di buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gabbia domestica nell'espressione di Fos nel mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) tale che la buona estinzione (Differenza di rango medio = 13,29 , p = 0,031), ma né i gruppi di scarsa estinzione (Mean Rank Diff. = 6,857, p > 0,999) né di richiamo della paura (Mean Rank Diff. = 8,000, p = 0,864) hanno mostrato più espressione di Fos rispetto al gruppo home cage (Fig. 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группе с отзывом страха (средняя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). C'era una differenza significativa nell'espressione di mvHPC Fos tra gruppi con buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e cellule domestiche (X2(3) = 8.056, p = 0.045), quindi buona estinzione (differenza di rango medio = 13.29), p = 0,031), ma né nel gruppo di scarsa estinzione (differenza di rango medio = 6,857, p > 0,999) né nel gruppo di richiamo della paura (differenza di rango medio = 8,000, p = 0,864) l'espressione di Fos era più alta che nel gruppo di casa.cella (Fig. 7A). mvHpc 中 fos 表达 的 良好 消退 、 不良 消退 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 存在 显着 差异 （x2 (3) = 8.056, p = 0,045） ， 因此 良好 消退 （（秩差 = 13,29） P = 0,031 ） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 = 6.857 ， P> 0.999） 还是 恐惧 回忆 （（平均 秩差 = 8.000 ， P = 0.864） 组都 显示 出 比 家庭 笼组 更 多 FOS 表达 （图 2））） mvHpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 之间 存在 显着 差异 差异 （（x2 (3) = 8.056, p = 0,045） ， 良好 （（（平均 秩差 = 13,29） P = 0,031） ， 但 无论是 弱消退 （平均 平均 秩差 = 6.857 ， P> 0,999） 还 是 恐惧 （（平均 秩差 秩差 = 8.000 ， P = 0,864） 组 出 家庭 笼组 多 的 FOS 表达 图 图 图 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 。。。。 ° 。。。。 tivamente )) Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» и «домашняя клетка» для экспрессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов = 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воспоминания о страхе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (ris. 2). C'era una differenza significativa tra il buono, il cattivo, il richiamo della paura e i gruppi di cellule domestiche per l'espressione di Fos in mvHPC (X2(3) = 8.056, p = 0.045) e quindi una buona regressione (differenza di rango medio = 13.29), p = 0.031), ma i gruppi con debole estinzione (differenza di rango medio = 6.857, p > 0.999) e ricordi di paura (differenza di rango medio = 8.000, p = 0.864) hanno mostrato un'espressione di Fos più alta rispetto al gruppo nella gabbia domestica (Fig. 2).7A).Tuttavia, non vi era alcuna differenza significativa (X2(3) = 4.893, p = 0.180) (Figura 7C).Inoltre, non vi era alcuna correlazione significativa tra l'espressione Fos globale in mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (Figura 7B) e l'espressione Fos nelle cellule IL afferenti mvHPC (rs = 0,056, p = 0,810) (Figura 7D) .e un rapporto sulla scomparsa.Inoltre, non vi era alcuna differenza significativa tra buona estinzione, scarsa estinzione, richiamo della paura e gruppi di cellule domestiche nell'espressione di Fos in pvHPC (X2(3) = 3,623, p = 0,353) (Figura 7E) e non vi erano differenze significative.differenza nella buona regressione dell'espressione di Fos nelle cellule IL afferenti pvHPC, scarsa regressione, memoria della paura e gruppi di cellule domestiche (X2 (3) = 3.871, p = 0.276) (Fig. 7G).Infine, non vi era alcuna correlazione significativa tra l'espressione Fos globale pvHPC (rs = -0,127, p = 0,584) (Figura 7F) e l'espressione Fos nelle cellule pvHPC IL-afferenti (rs = 0,176, p = 0,447) e il richiamo dell'estinzione (Figura 7F ).7H).
L'espressione di Fos è elevata nell'ippocampo ventrale dei ratti, indicando una buona estinzione della memoria.(A) Il gruppo ben estinto, ma non gli altri gruppi, ha mostrato una maggiore espressione di Fos in mvHPC rispetto al gruppo di cellule domestiche.(B) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos e il richiamo dell'estinzione in mvPHC.(C) L'espressione di Fos nelle cellule IL afferenti mvHPC non differiva significativamente tra i gruppi.(D) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos negli afferenti IL e il richiamo dell'estinzione in mvHPC.(E) Non c'erano differenze significative tra i gruppi nell'espressione di Fos in pvHPC.(F) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos e il richiamo dell'estinzione in pvHPC.(G) L'espressione di Fos nelle cellule IL afferenti pVHPC non differiva significativamente tra i gruppi.( H ) Non c'era alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Fos negli afferenti IL e il richiamo dell'estinzione in pvHPC.Le barre di errore rappresentano la deviazione standard della media. *p<0,05. *p<0,05. *ð < 0,05. *p<0,05. *p<0,05。 *p<0,05。 *ð < 0,05. *p<0,05.La nostra analisi primaria per tutte le regioni ha mostrato un confronto a tre livelli lungo l'asse anteroposteriore, sebbene abbiamo anche analizzato ogni regione che è collassata lungo l'asse anteroposteriore.I risultati di queste analisi sono presentati nella tabella 1.
Qui abbiamo testato se le differenze individuali nel ricordo dell'estinzione si sarebbero riflesse in diversi modelli di attività afferente nella corteccia limbica inferiore.A tal fine, abbiamo valutato l'attività di Fos nelle proiezioni IL dal talamo paraventricolare, dal claustrum, dalla tonsilla basolaterale e dall'ippocampo ventrale dopo la riproduzione dell'estinzione.Nelle cellule che proiettano IL, abbiamo riscontrato una maggiore attività nella regione posteriore del PVT nei ratti che hanno mostrato un buon richiamo all'estinzione rispetto ai ratti con scarsa estinzione.Non c'erano differenze nelle afferenze IL dal nucleo clavicolare, dall'ippocampo ventrale o dalla tonsilla basolaterale.Oltre alle cellule che proiettano IL, è stata osservata una maggiore attività neurale in aree selezionate del claustrum di ratto e dell'ippocampo ventrale con buona risoluzione.I nostri risultati indicano che la memoria di estinzione di successo è organizzata da specifiche proiezioni PVT a cellule IL e non IL-targeting nel claustrum e nell'ippocampo ventrale.
Abbiamo scoperto che la previsione IL PVT era attiva nei ratti che mostravano un buon richiamo all'estinzione, il che è coerente con un recente studio che mostra che il PVT è necessario per il richiamo all'estinzione.Questo studio non ha utilizzato manipolazioni specifiche della sottoregione, ma ha mostrato che entrambe le proiezioni PVT sull'amigdala centrale laterale e le proiezioni IL su PVT erano necessarie per riprodurre l'estinzione.I nostri risultati indicano che, oltre alla catena IL-PVT-CeL, potrebbe essere necessaria anche un'entrata post-PVT in IL per il richiamo dell'estinzione.Pertanto, risulta che sia le connessioni IL efferenti che quelle afferenti sono coinvolte nella riproduzione dell'estinzione.Un importante passo successivo è determinare cosa fa sì che pPVT segnali la riproduzione dell'estinzione a livello del circuito neurale.Oltre alla relazione con IL, precedenti studi di monitoraggio dei dotti31,32 hanno dimostrato che pPVT riceve input dal grigio periacqueduttale ventrale (vPAG), che è associato all'apprendimento dell'estinzione33,34,35,36.Sebbene il ruolo di vPAG nel richiamo dell'estinzione non sia stato stabilito, la previsione di pPVT da parte di vPAG è un candidato interessante a causa della loro densità e del coinvolgimento di entrambe le regioni nella generazione di prove precedenti dell'estinzione della paura.
Un altro aspetto importante dei nostri risultati PVT è che sono specializzati lungo il loro asse antero-posteriore.Sorprendentemente, l'attività neuronale della proiezione PVT in IL è correlata con lo stato comportamentale opposto, tale che l'attività di proiezione pre-PVT in IL è associata al richiamo della paura, mentre la proiezione pPVT è attiva dopo l'estinzione riuscita del richiamo (cioè, la paura).Questa eterogeneità funzionale all'interno del PVT non è sorprendente dato il lavoro precedente [discusso in 37].Un esempio lampante di distribuzione funzionale nella PVT è recentemente emerso in uno studio che ha caratterizzato le proprietà di specifici tipi cellulari nella PVT.Questo studio mostra che le cellule della dopamina che esprimono DRD2 sono espresse prevalentemente in pPVT, innervano la corteccia degli arti anteriori e rispondono a stimoli avversi.La seconda popolazione cellulare è prevalentemente espressa in aPVT e segna il passaggio ad uno stato di basso arousal fisiologico e innerva la corteccia degli arti inferiori.I nostri risultati difficilmente rientrano in questo schema, poiché le cellule aPVT che proiettano IL sono attive durante il richiamo della paura, mentre le proiezioni pPVT sono attive e gli animali mostrano bassi livelli di paura.Ci sono almeno due possibili spiegazioni per l'apparente discrepanza.Innanzitutto, i tipi cellulari identificati non si trovano esclusivamente in un sito antero-posteriore del TVV.Pertanto, le cellule pPVT attive che proiettano l'IL nei ratti con una buona memoria di estinzione possono appartenere a una classe di cellule che hanno maggiori probabilità di essere rilevate in aPVT e segnalare una transizione a uno stato di bassa eccitazione.Lo stesso può essere vero per le cellule che proiettano IL in aPVT attivato dopo la memoria della paura.In secondo luogo, precedenti studi di tracciamento hanno identificato la presenza di pPVT che proiettano IL3, sebbene alcuni sembrino derivare da cellule contenenti DRD2, altri tipi di cellule possono proiettarsi su IL e attivarsi dopo una riproduzione riuscita del quenching.
Sebbene lo scopo di questo studio fosse identificare le differenze tra i ratti che esibivano diversi fenotipi di estinzione, questi esperimenti hanno anche rivelato nuovi dati relativi ai meccanismi di memoria della paura.È interessante notare che abbiamo riscontrato un aumento dell'attività di Fos nel CLA anteriore nei ratti con memoria della paura.
La clavicola è posizionata come il centro della comunicazione corticale ed è coinvolta in processi che vanno dall'integrazione sensoriale all'attenzione e al sonno40,41,42,43.Esistono prove limitate su come il claustrum sia coinvolto nel condizionamento della paura o nell'espressione della paura, tuttavia, ricerche precedenti hanno dimostrato che l'espressione contestuale della paura è coinvolta nell'attività di Fos nel claustrum.È stato recentemente riportato che l'inibizione delle proiezioni di atresia alla corteccia entorinale durante il condizionamento contestuale alla paura compromette la formazione della memoria a lungo termine, sebbene il loro bisogno di espressione della paura non sia stato testato.Nello stesso studio, è stata osservata una maggiore attivazione di Fos quando gli animali sono stati esposti a un nuovo ambiente rispetto ai topi esposti a un ambiente familiare.Con questo in mente, l'attivazione del CLA che riportiamo qui potrebbe essere dovuta all'esposizione alla nuova fotocamera durante i test, piuttosto che alla paura del richiamo stesso.Per caratterizzare più accuratamente la funzione dei blocchi nella paura e nell'elaborazione situazionale, gli studi futuri dovrebbero utilizzare la manipolazione mirata dei blocchi.
Sebbene il lavoro precedente abbia dimostrato che la PVT è associata all'espressione della memoria della paura,45,46,47 non abbiamo osservato alcun cambiamento nell'espressione totale di Fos nei ratti quando hanno ricordato la paura 48 ore dopo il condizionamento.Questa differenza può essere spiegata da diversi fattori, incluso il lavoro precedente che ha testato la paura di segnali discreti nello stesso contesto in cui ha avuto luogo il condizionamento, mentre nel nostro esperimento il test è stato svolto in una nuova stanza.Inoltre, abbiamo soppresso i nostri animali 60 minuti dopo il test, mentre il lavoro precedente utilizzava un punto temporale di 90 minuti.Infine, in studi precedenti, il test è stato condotto in una stanza in cui gli animali potevano rispondere con appetito, mentre nel nostro lavoro i ratti sono stati testati senza una risposta di appetito.Sebbene ciò consenta un certo grado di inibizione condizionata, ci sono prove che consentire agli animali di inibire la pressione per ottenere cibo mentre si verifica se temono i segnali crea un conflitto motivazionale (cioè paura contro ricompensa), che è un fattore stimolante chiave.partecipazione PVT48, 49. .
È noto che l'amigdala basolaterale è coinvolta nell'acquisizione dell'estinzione della paura50,51 e ci sono prove che anche le proiezioni BLA verso IL siano coinvolte in questo processo23.Tuttavia, non è chiaro se il BLA e le sue connessioni siano coinvolte nel ritorno dell'estinzione.Studi di imaging23,28 hanno mostrato un aumento dell'attività del BLA negli animali che ricordano ricordi sbiaditi.Mentre il nostro lavoro precedente non ha mostrato alcuna differenza nell'attivazione di BLA tra ratti di estinzione buoni e cattivi, i nostri risultati qui suggeriscono che il richiamo dell'estinzione generalmente non influisce su BLA o attivazione nella previsione di BLA IL.Coerentemente con i nostri risultati, sebbene gli studi sulla manipolazione dei circuiti suggeriscano che gli input IL al BLA sono importanti per l'apprendimento dell'estinzione, non sono necessari per il richiamo dell'estinzione.Tuttavia, il ruolo del BLA non può essere completamente ignorato poiché prove recenti suggeriscono che alcuni tipi di cellule nel BLA sono necessari per riprodurre l'estinzione.
In particolare, il ricordo della paura non ha provocato l'attivazione di Fos nel BLA, poiché precedenti studi su lesioni, farmaci e imaging hanno implicato quest'area nell'espressione della paura e/o nel riconsolidamento della paura dopo il recupero54,55,56,57.I dati qui presentati combinano il subnucleo basale e laterale dell'amigdala e i dati precedenti suggeriscono che l'espressione della paura guida l'attività di Fos sul lato dorsale del nucleo laterale.Abbiamo analizzato separatamente i dati sottostanti e laterali, ma non c'era alcuna differenza in entrambi i casi (dati non mostrati) ed entrambe le aree sono collassate nei dati che presentiamo qui.Non abbiamo analizzato le sottoregioni dell'amigdala laterale, quindi i cambiamenti specifici in quest'area potrebbero essere mascherati.Un'altra possibilità di nessun cambiamento nell'attività di Fos in BLA è dovuta alla tempistica dei ricordi di paura rispetto al condizionamento.Alcuni lavori precedenti hanno dimostrato che il contributo di BLA all'espressione della paura diminuisce con il tempo dopo il condizionamento, in modo tale che l'espressione sia dipendente da BLA a 24 ore dopo il condizionamento ma indipendente a 7 giorni (rif. 45 ma vedi 58).si è verificato 48 ore dopo l'allenamento, facendo in modo che la mancanza di cambiamento nell'attività di Fos in questo momento rifletta probabilmente i cambiamenti dipendenti dal tempo nella partecipazione del BLA all'espressione della paura.
Infine, troviamo prove che la memoria di estinzione riuscita è associata all'ippocampo ventrale.Questo è caratteristico dei vHPC "intermedi" poiché lo stesso modello non è stato visto nella regione posteriore.Coerentemente con il lavoro precedente, non abbiamo riscontrato alcun cambiamento nell'attivazione di Fos negli IL vHPC afferenti.Esistono prove sostanziali che vHPC28,60,61 è necessario per l'attualizzazione della paura quando CS si verifica al di fuori del contesto in cui si verifica lo sbiadimento e che ciò dipende almeno in parte dall'ingresso di vHPC in IL13.Sulla base di questi risultati precedenti, ci aspetteremmo che uno scarso sbiadimento sia associato a una maggiore attività IL prevista di vHPC.Tuttavia, questo non era il caso in quanto non vi era alcuna differenza nell'attività di Fos nei vHPC retrogradi proiettati con IL o nelle cellule non etichettate nei vHPC.Ciò suggerisce che l'incapacità di ricordare lo sbiadimento nel contesto dello sbiadimento può innescare un meccanismo diverso dalla paura del rinnovamento.
È importante notare alcuni dei limiti intrinseci di progettazione e analisi e il modo in cui influenzano le nostre conclusioni.Innanzitutto, abbiamo diviso gli animali in terzo superiore e inferiore e i topi in "buoni" e "cattivi" in base ai punteggi di richiamo dell'estinzione.Questo viene fatto per evitare schemi di gruppo che dividono gli animali in gruppi separati dalla metà della distribuzione, o schemi di gruppo che escludono gli animali dalla metà della distribuzione, come la separazione per mediana o il confronto dei terzi superiore e inferiore dei ratti .vogliamo evitare questa situazione perché la divisione mediana non riflette la variabilità delle risposte umane al trauma che stiamo cercando di modellare.Inoltre, mentre il confronto tra il terzo superiore e quello inferiore dei ratti ci consente di confrontare gruppi di dimensioni simili, questo approccio ignora gli animali al centro della distribuzione e non riflette accuratamente la variabilità nelle reazioni al danno.Sebbene il nostro metodo possa soffrire di problemi con la varianza eterogenea e il confronto di gruppi con dimensioni del campione disuguali, cattura ciò che stiamo cercando di imitare meglio dei metodi alternativi.
I risultati qui presentati ci aiutano a capire meglio come le differenze individuali nel ricordo dell'estinzione si riflettono nelle differenze nell'attività del circuito neurale.I nostri risultati possono essere rilevanti per il disturbo da stress post-traumatico, che è noto per essere associato a paura eccessiva e incapacità di eliminare le risposte di paura.Mostriamo che le differenze nel richiamo dell'estinzione sono associate a differenze nell'attività neurale intrinseca ed estrinseca proiettata su IL.Queste differenze sono state distribuite in regioni distinte lungo l'asse anteroposteriore, evidenziando ulteriormente l'importanza di valutare la funzione cerebrale a livello subregionale.Gli svantaggi del metodo attuale includono la pertinenza dello studio e l'attenzione sui roditori maschi.La ricerca futura dovrebbe determinare i meccanismi neurobiologici alla base dell'apprendimento dell'estinzione nei roditori femmine e utilizzare metodi per trarre inferenze causali.
I set di dati utilizzati e/o analizzati nel presente studio sono disponibili presso i rispettivi autori su ragionevole richiesta.
Pavlov IP Conditioning: uno studio dell'attività fisiologica della corteccia cerebrale.(Stampa dell'Università di Oxford, 1927).
Rothbaum, BO e Davis, M. Applicazione dei principi di apprendimento al trattamento delle reazioni post-trauma. Rothbaum, BO e Davis, M. Applicazione dei principi di apprendimento al trattamento delle reazioni post-trauma.Rotbaum BO e Davis M. Applicazione dei principi dell'apprendimento al trattamento delle reazioni post-traumatiche.Rotbaum BO e Davis M. Applicazione dei principi di apprendimento nel trattamento delle reazioni post-traumatiche.installare.Collegio di New York.la scienza.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Revisione della terapia dell'esposizione: un gold standard per il trattamento del disturbo da stress post-traumatico. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Revisione della terapia dell'esposizione: un gold standard per il trattamento del disturbo da stress post-traumatico.Rauch SA, Eftekhari A. e Ruzek DI Una revisione della terapia dell'esposizione: il trattamento gold standard per il disturbo da stress post-traumatico. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Revisione della terapia dell'esposizione: il gold standard per il trattamento del disturbo da stress post-traumatico.Rauch, SA, Eftekhari, A. e Ruzek, DI Una revisione della terapia dell'esposizione: il trattamento gold standard per il disturbo da stress post-traumatico.J. Riabilitazione.sviluppo del serbatoio 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Terapia a lunga esposizione: passato, presente e futuro.Repressione dell'ansia 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Mr. Millard et al.Cause esistenziali e acquisite di perdita di memoria nel disturbo da stress post-traumatico: risultati di uno studio sui gemelli.J. Psichiatra.serbatoio di stoccaggio.42(7), 515-520 (2008).
Mr. Millard et al.La base neurobiologica dell'incapacità di richiamare ricordi sbiaditi nel disturbo da stress post-traumatico.biologia.Psicologia.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Differenze individuali nella paura: isolamento della reattività alla paura e fenotipi di recupero della paura. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Differenze individuali nella paura: isolamento della reattività alla paura e fenotipi di recupero della paura.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. e LeDoux, JE Differenze individuali nella paura: fenotipi distintivi di reattività alla paura e ripristino della paura. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Differenze individuali nella paura: isolamento della risposta alla paura e tabella di recupero dalla paura.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. e LeDoux, JE Differenze individuali nella paura: l'isolamento delle risposte alla paura e il fenotipo del recupero della paura.J. trauma.pressione 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG La risposta di allarme acustico nei ratti prevede la variazione interindividuale nell'estinzione della paura. Russo, AS & Parsons, RG La risposta di allarme acustico nei ratti prevede la variazione interindividuale nell'estinzione della paura.Russo, AS e Parsons, RG La risposta di allarme acustico nei ratti prevede differenze individuali nell'estinzione della paura. Russo, AS & Parsons, RG è un produttore di prodotti per la casa editrice. Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS e Parsons, RG La risposta di allarme acustico nei ratti prevede differenze individuali nell'estinzione della paura.Neurobiologia.studia.Memoria.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG La variabilità individuale nel richiamo dell'estinzione della paura è associata alla fosforilazione della protein chinasi attivata dal mitogeno nella corteccia infralimbica. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG La variabilità individuale nel richiamo dell'estinzione della paura è associata alla fosforilazione della protein chinasi attivata dal mitogeno nella corteccia infralimbica.Russo, AS, Lee, J. e Parsons, RG La variabilità individuale nell'estinzione del richiamo della paura è associata alla fosforilazione della chinasi proteica attivata dal mitogeno nella corteccia infralimbica. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG sono i principali produttori del settore. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Il ricordo dello sbiadimento della paura è correlato alle differenze individuali nella fosforificazione periferica del sangue.Russo, AS, Lee, J. e Parsons, RG Le differenze individuali nell'estinzione della paura durante il richiamo sono associate alla fosforilazione delle chinasi proteiche attivate dal mitogeno nella corteccia degli arti inferiori.Psicofarmacologia 236(7), 2039–2048 (2019).